RBC裂解液

RBC裂解液，RBC-1601/RBC-1602 , 适用于裂解红细胞，而不损伤其它有核细胞【产品简介】：

ZDGSY生产的红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer)，是一种用于从人或动物的血液或组织样品中裂解或去除红细胞的溶液。本裂解液经过优化调整，只裂解红细胞而几乎不损伤其它有核细胞。 本产品包装前已经过无菌处理，如红细胞裂解液处理后的样品要做细胞培养或细胞融合，请在超净工作台内进行整个裂解操作过程。

【保存条件】： 4°C保存，一年有效。室温保存， 3个月有效。

【组织细胞样品操作】：

1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理后，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2. 加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，混匀，裂解1-2分钟（本步骤可在室温或4°C度操作）。
3. 10000rpm离心5分钟，弃红色上清。（4°C离心效果更佳）。
4. 如果发现红细胞裂解不*，可以重复上述步骤2-3一次，通常微量红细胞不会影响后续检测。
5. 加入适量PBS、生理盐水或无血清培养液洗涤细胞（400-500g离心2-3分钟，弃上清）。
6. 可重复第5步1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍，4°C离心效果更佳。
7. 根据实验需求，用适量溶液重悬细胞后即可进行计数等后续实验。如组织细胞不需要培养等实验，则洗涤步骤（4-6）可省去。

【血液样品】：

1. 取新鲜抗凝血，加入3-5倍血液体积的红细胞裂解液，混匀，裂解1-2分钟（本步骤可在室温或4度操作，对于鼠的血液，裂解1-2分钟已经足够，对于人或牛大型动物的外周血，裂解时间需延长至6-10分钟，并且裂解过程中要偶尔摇动试管以促进红细胞裂解（裂解通常不超过15分钟）。
2. 10000rpm离心5分钟，弃上清(如果发现红细胞裂解不*，可以重复上述步骤1-3次。如所得BBC是用于核酸提取，则不需重复裂解过程，少量RBC的存在，并不影响下游实验，且下列步骤可省去，弃上清后直接加入白血病裂解液即可按照核酸提取步骤操作)。
3. 加入5倍细胞体积的PBS、生理盐水或无血清培养液，重悬有核细胞，10000rpm离心2-3分钟，弃上清。
4. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
5. 如所得白血病只是为提取DNA，则可在室温下操作；若白血病为提取RNA，在4°C操作效果更佳。